(Princesa Palhaça do Crime, Rainha de Gotham e Arlequina)
A origem de Arlequina é contada no quadrinho "Mad Love" ("Louco Amor"), de fevereiro de 1994, vencedor do Prêmio Eisner. Seu nome foi baseado no arlequim, com a intenção de ser um trocadilho ao seu nome original, Harleen Quinzel. Arlequina é frequentemente cúmplice e companheira amorosa do vilão Coringa, o qual ela conheceu enquanto trabalhava como psiquiatra no Asilo Arkham, onde o Coringa era paciente.
"Mad Love" conta que Harleen Quinzel destacou-se durante o período escolar como uma ginasta, o que lhe permitiu estudar Psicologia na Universidade de Gotham City. Posteriormente, trabalhou como psiquiatra no Manicômio Arkham, onde conheceu Coringa, seu paciente. Enganada pela história de que ele havia tido uma infância infeliz, Quinzel apaixona-se profundamente, ajudando Coringa a escapar por diversas vezes do asilo. Quando Coringa é trazido de volta para Arkham após uma luta com Batman, a imagem de seu paciente gravemente ferido leva Harleen à loucura, fazendo com que ela largue seu trabalho como psiquiatra, roube uma fantasia de arlequim, invada Arkham e liberte Coringa, tornando-se Arlequina."Mad Love" foi premiada com o Prêmio Eisner de Melhor História no mesmo ano.
O relacionamento entre Coringa e Arlequina é abusivo e um dos mais complexos do Universo DC. No episódio "Harley and Ivy" de Batman: A Série Animada, o Coringa expulsa Arlequina violentamente de sua gangue, deixando-a extremamente frustrada. Ela, então, resolve roubar o Diamante Arlequim do museu de Gotham City para provar o seu valor. No mesmo instante, Hera Venenosa rouba plantas tóxicas do museu. As duas rapidamente tornam-se amigas e Hera Venenosa a leva para o seu lar, em um local de despejo de lixo tóxico. Hera Venenosa aplica-lhe uma injeção de soro que torna Arlequina imune a todas as toxinas e venenos, além de uma melhoria em sua força e agilidade. Juntas, praticam diversos delitos, ficando conhecidas como as "Rainhas do Crime" de Gotham City. A amizade é várias vezes abalada pela reprovação de Hera ao relacionamento entre Arlequina e Coringa, pois sente que o Coringa não dá o devido valor a sua companheira, sabendo que ele a maltrata às vezes. Por isso, Hera está sempre tentando persuadir Arlequina a desistir de sua paixão, sem sucesso.
A revista Batman: Harley Quinn apresenta outra versão sobre a origem da amizade entre Arlequina e Hera Venenosa. Em dúvidas se realmente sente algo por Arlequina ou não, Coringa deixa o seu lado mau prevalecer. Ele a amarra em um foguete, que aterrissa em Robinson Park. Hera Venenosa a encontra e a salva, quando reconhece que se trata da Dra. Harleen Quinzel, que ela conheceu no Asilo Arkham. O plano inicial de Hera Venenosa é matá-la, porém tal ideia foi vencida pela curiosidade. Hera convence Arlequina a contar toda sua história e acaba notando alguma semelhança na história de Arlequina com a sua. Ela propõe a Arlequina a proposta de juntas elas se vingarem de Batman e se reconciliar com o Coringa. Arlequina aceita.
Depois do sucesso em Batman: A Série Animada e The New Batman Adventures, Harley faz várias outras aparições animadas. Ela aparece como uma das quatro principais personagens femininas do web cartoon Gotham Girls. Ela também fez aparições em outros desenhos animados no universo animado da DC, aparecendo no episódio "Wild Cards" (ao lado do Coringa) da Liga da Justiça e no episódio "Hard as Nails" (ao lado de Hera).
Arlequina é bissexual, tendo tido relacionamentos com o Coringa e a Hera Venenosa. A personagem com os anos acabou se tornando um ícone bi.